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組織總磷含量檢測試劑盒

更新時間:2019-11-06

簡要描述:

測定意義:
磷的存在形態包括無機磷與有機磷。無機磷主要指磷酸根,參與生物體內多種代謝,包括能量代謝、核酸代謝、蛋白質磷酸化和脫磷酸化等。通過測定總磷與無機磷含量即可了解作物對磷的利用率,進而為合理施肥提供依據。
組織總磷含量檢測試劑盒

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組織總磷含量檢測試劑盒

測定原理:

總磷經消化后,轉化成無機磷。鉬藍法是測定無機磷含量的經典方法,一定條件下,鉬藍與磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物質,通過測定660nm光吸收,即可計算無機磷含     量,進而可計算出組織中總磷含量。

自備儀器和用品:

離心機、水浴鍋、可調式移液槍、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水和濃硫酸。

試劑組成和配置:

試劑一:液體×1瓶,4℃保存(強腐蝕性,強氧化性)。

試劑二:液體×1瓶,4℃保存。

試劑三:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前配制,加入7.5mL蒸餾水,溶解后再加入5mL試劑二,混勻。

標準品:液體×1支,20μmol/L無機磷標準液,-20℃保存。

有機磷消化:

取帶蓋試管,加入精確稱取的約0.1g組織,加濃硫酸1 mL,蓋緊(防止水分散失)后沸水浴10min左右,待溶液呈黑色或棕色時取出。稍冷后,加試劑一200μL,充分混勻,蓋緊后繼續沸水浴,直到溶液呈透明狀,取出室溫冷卻后,加蒸餾水8.8 mL,充分混勻;室溫,10000rpm,離心10min,取上清液,待測。

測定:

1. 分光光度計預熱30 min以上,調節波長到660 nm,蒸餾水調零。

2.打開水浴鍋,調節溫度到40℃。

3. 空白管:0.5mL EP管,依次加入100μL蒸餾水,100μL試劑三,混勻后置于40℃水浴保溫10min,室溫冷卻10 min后于660 nm測定吸光度,記為A空白管。

4. 標準管:0.5mL EP管,依次加入10μL標準液,90μL蒸餾水,100μL試劑三,混勻后置于40℃水浴保溫10min,室溫冷卻10 min后于660 nm測定吸光度,記為A標準管。

5. 測定管:0.5mL EP管,依次加入10μL上清液,90μL蒸餾水,100μL試劑三,混勻后置于40℃水浴保溫10min,室溫冷卻10 min后于660 nm測定吸光度,記為A測定管。

注意事項:

1、試劑三需臨用前配制,限當天使用。

2、測定前先用1~2個樣品做預實驗,如吸光值很高,需用蒸餾水做相應稀釋。

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